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骨髓细胞培养基
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【预期用途】

用于细胞增殖培养,不具备对细胞的选择、 诱导、分化功能,培养后的细胞用于体外诊断。(不用于微生物鉴别和药敏实验)。


【检验原理】

可以支持原代骨髓细胞短期培养,在中期阶段加入有丝分裂抑制剂,阻止有丝分裂,提供后续检测,如染色体核型分析。


【主要组成成分】

含有谷氨酰胺的RPMI-1640基础培养基、胎牛血清、抗生素


【适用范围】

骨髓体外增殖培养。


【储存条件及有效期】

培养基应贮存在-10~-20℃,有效期为2年,溶解后应存放于2-8℃,并于10天内使用。 存放及使用时注意避光。


【生产日期与失效日期】

详见产品标签。


【使用仪器】

显微镜、二氧化碳细胞培养箱、离心机。


【样本要求】

新鲜骨髓细胞




【使用方法】

1.   种骨髓:向装有10ml培养基的玻璃或塑料瓶中接种0.5ml的骨髓穿刺液,轻轻转动培养管使混合。

2.   培养:置37℃二氧化碳细胞培养箱培养72小时。

3.   终止培养:向每个培养管中加入秋水仙酰胺溶液,终浓度为0.1ug/ml,静置15-30分钟。

4.   收获细胞:将培养液转移至离心管中,离心力500g,离心5分钟。

5.   低渗处理:除去上清液,加入5-10ml 0.075M KCl溶液重新悬浮细胞,37℃孵化10-12分钟。

6.   离心:500g,离心5分钟,弃去上清液。

7.   固定:固定液为醋酸:甲醇=1:3,每个离心管中逐滴加入新鲜配制的、预冷的固定液5-10ml。置于4℃10分钟。

8.   再固定:重复步骤6和7。

9.   滴片:加入0.5-1ml固定液制成悬液。用吸管吸取细胞悬液,滴至干燥洁净的载玻片上,空气中晾干。

10.经吉姆萨染色处理后做染色体核型分析。


【参考值(参考范围)】

细胞倍增指数大于2


【检验结果的解释】

细胞培养时间、加入秋水仙酰胺的量以及低渗操作时间对结果影响较大,如发现制片所得的分裂相较少,需要对实验条件及样品进行确认。


【检验方法的局限性】

仅用于骨髓细胞培养


【产品性能指标】

1.       装量差异限度:±3%

2.       澄清度:澄清

3.       PH值:7.2-7.6

4.       渗透压(mOsm/kg):280-320

5.       无菌检测:无菌

6.       内毒素(EU/ml):<10

7.       细胞生长实验:细胞倍增指数大于2


【注意事项】

1.       本品仅用于体外诊断,不用于临床治疗,严禁内服,不能用嘴吸液。

2.    试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。

3.    操作过程应避免污染。

4.    操作人员在检验时应做好防护,预防血液病传播。

5.    操作人员万一与皮肤、粘膜接触,请立即用自来水冲洗。

6.    溶液应为澄清,如有沉淀物,严禁使用。

7.    禁止使用超出规定有效期的产品。


市场价
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价格
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品牌
Vivacell
型号
C3630-0100
规格
100ml
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