Cell Signaling(CST) 8818 Active Rap1 Detection Kit
产品编号 8818 | Cell Signaling(CST)
Cell Signaling Technology公司的细胞分析试剂盒提供了从头至尾的试剂和可行的操作步骤,从而在最少的时间内得到最精确的结果。这些充分验证的全套试剂盒可用于评估细胞生存、增殖、生存能力以及酶和激酶活性。
产品描述
Kit Includes | Quantity | Applications | Reactivity | Homology† | MW (kDa) | Isotype |
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GTP γS | 50 µl |
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GDP | 50 µl |
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Glutathione Resin | 3 ml |
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Lysis/Binding/Wash Buffer | 100 ml |
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SDS Sample Buffer | 1.5 ml |
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Spin Cup and Collection Tubes | 30 ea |
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GST-RalGDS-RBD | 600 µg |
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Rap1 Rabbit mAb | 50 µl |
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Specificity / Sensitivity
Active Rap1 Detection Kit detects endogenous levels of GTP-bound (active) Rap1 as shown in Figure 1. This kit detects proteins from the indicated species, as determined through in-house testing, but may also detect homologous proteins from other species. 如图1,Active Rap1 Detection试剂盒可以检测内源性的GTP-bound (active) Rap1。通过内部测试,该试剂盒能够检测来自指定物种的蛋白,但也可能会检测到其他物种中的同源蛋白。
Description
The Active Rap1 Detection Kit provides all reagents necessary for measuring activation of Rap1 GTPase in the cell. GST-RalGDS-RBD fusion protein is used to bind the activated form of GTP-bound Rap1, which can then be immunoprecipitated with glutathione resin. Rap1 activation levels are then determined by western blot using a Rap1 Rabbit Antibody.Active Rap1 Detection试剂盒提供了足以检测细胞中激活状态的Rap1 GTPase的所有试剂。GST-RalGDS-RBD融合蛋白用于与GTP-bound Rap1的激活状态结合,随后可以被谷胱甘肽树脂免疫沉淀。Rap1的激活水平随后使用一个Rap1 Rabbit 抗体通过western blot实验检测。
Background
小GTP-结合蛋白(G蛋白)Ras超家族包括了一大类蛋白(超过150个成员),基于其序列和功能相似性,可以被分为至少5组:Ras, Rho, Rab, Arf, 和 Ran (1-3).这些小G蛋白拥有GDP/GTP-结合和GTPase功能,能够在多种细胞和发育过程中发挥双向调控作用,包括细胞周期演进,细胞生存,细胞骨架重构,细胞极化和运动,囊泡和细胞核转运(1)。上游信号刺激GDP从GDP-结合形式(失活)解离,随后导致GTP结合形成GTP-结合形式(激活)。激活的G蛋白的下游效应结合区域经过构象变化,导致下游效应分子的结合和调控。这个激活状态能被GTPase关闭,它会水解GTP为GDP释放下游效应分子。这些Ras超家族蛋白固有的鸟苷酸交换和GTP水解活性也被鸟苷酸交换因子(GEFs)调节,GEFs会促进激活的GTP-结合形式和GTPase激活蛋白(GAPs)的形成,而GAPs会使GTPase变为GDP-结合失活形式(4)。
Rap1和Rap2都属于小GTPases的Ras超家族,可以被多种刺激因素激活,包括整合素,受体酪氨酸激酶(RTKs),G protein-coupled receptors (GPCR), death domain associated receptors(DD-R)和离子通道(5,6)。和其他小GTPases一样,Rap的活性通过鸟苷酸交换因子(GEFs)激活,失活则是通过GTPase激活蛋白 (GAPs).已经发现了多种Rap GEFs:C3G通过接头蛋白,例如Crk, 连接Rap1和TRKs,Epacs (or cAMP-GEFs)转运来自cAMP的信号,CD-GEFs (or CalDAG-GEFs)运输分别或同时来自Ca2+ and DAG的信号(5).Rap1最初调节多种整合素依赖的步骤,例如形态发生,细胞-细胞黏附,造血,白细胞迁移和肿瘤侵润(5,6)。Rap1可能也通过下有银子包括B-Raf, PI3K, RalGEF和phospholipases (PLCs),调控增殖,分化和生存(5-8)。Rap1和Rap2功能上并不相关,他们发挥着有交叉但是极为不同的功能(9)。最近的研究指出Rap2调控Dsh亚细胞定位,也是发育早期Wnt信号通路所必需的的(10)。
1 Takai, Y. et al. (2001) Physiol Rev81, 153-208.
2 Colicelli, J. (2004) Sci STKE2004, RE13.
3 Wennerberg, K. et al. (2005) J Cell Sci118, 843-6.
4 Vigil, D. et al. (2010) Nat Rev Cancer10, 842-57.
5 Bos, J.L. et al. (2001) Nat Rev Mol Cell Biol2, 369-77.
6 Caron, E. (2003) J Cell Sci116, 435-40.
7 Song, C. et al. (2002) Oncogene21, 8105-13.
8 Rong, R. et al. (2003) J Biol Chem278, 52497-503.
9 Taira, K. et al. (2004) J Biol Chem279, 49488-96.
10 Choi, S.C. and Han, J.K. (2005) EMBO J24, 985-96.
常见问题及解答
Ø抗体芯片的保质期是多久?有多个孔,我一次用不了那么多,该如何保存?
ØELISA 有标准品吗?我如果买了其他公司的标准品,可不可以配套使用?
公司介绍
CST公司是一家由研究型科学家创建于1999年的家族式私营企业,在全球范围内拥有超过400多名员工。CST活跃于应用系统生物学研究,尤其是与癌症相关的领域。作为一家始终致力于科学研究的公司,CST深知抗体的高特异性和批次间性能的一致性至关重要。因此我们坚持自己生产所有的抗体,并在多种应用中进行严格的验证。同时,正是生产这些抗体的CST科学家为客户提供技术支持,帮助他们设计实验,解决问题以获得最可靠的结果。我们之所以这样做,是因为如果我们做实验,我们也想要得到同样的服务。事实上,CST的确是这样的。
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