Cell Signaling(CST) 9474  PathScan® Akt Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout)

产品编号 9474 | Cell Signaling(CST)

• 产品描述




Kit Includes	Quantity	Applications	Reactivity	Homology†	MW (kDa)	Isotype
Detection Antibody Cocktail (10X)	300 µl
Array Slides - Akt Signaling Array	2 ea
16-Well Gasket	2 ea
20X LumiGLO®Reagent and 20X Peroxide #7003	5 ml each
PathScan® Sandwich ELISA Lysis Buffer (1X) #7018	30 ml
HRP-Linked Streptavidin (10X)	300 µl
20X Array Wash Buffer	15 ml
Sealing Tape	2 sheets
Array Blocking Buffer	5 ml
Chemiluminescent Development Folder	2
Array Diluent Buffer	15 ml




Specificity / Sensitivity

• PathScan® Akt Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout) detects the indicated cellular proteins and signaling nodes only when phosphorylated at the specified residues (see Array Target Map). No substantial cross-reactivity has been observed between targets. This kit is optimized for cell lysates diluted to a total protein concentration between 0.2 and 1 mg/ml (see kit protocol). All capture antibodies have been validated for human and mouse-derived samples.
• PathScan® Akt Signaling Antibody Array试剂盒（Chemiluminescent Readout）能够检测特定位点磷酸化的（见Array靶图）细胞蛋白和信号。不同靶点没有交叉反应。该试剂盒已经针对梯度稀释后的0.2到1mg/ml的总蛋白裂解液进行了优化（见试剂盒说明书）。所有抗体都经过了人和小鼠来源样品的验证。

Description

• The PathScan® Akt Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout) uses glass slides as the planar surface and is based upon the sandwich immunoassay principle. The array kit allows for the simultaneous detection of 16 phosphorylated proteins predominantly belonging to the Akt signaling network. Target-specific capture antibodies have been spotted in duplicate onto nitrocellulose-coated glass slides. Each kit contains two 16-pad slides, allowing the user to test up to 32 samples and generate 512 data points in a single experiment. Cell lysate is incubated on the slide followed by a biotinylated detection antibody cocktail. Streptavidin-conjugated HRP and LumiGLO® Reagent are then used to visualize the bound detection antibody by chemiluminescence. An image of the slide can be captured with either a digital imaging system or standard chemiluminescent film. The image can be analyzed visually or the spot intensities quantified using array analysis software.
• PathScan® Akt Signaling Antibody Array试剂盒（Chemiluminescent Readout）使用玻片作为二维平面，基于三明治免疫分析原理。该试剂盒可以同时检测16种属于Akt信号通路的磷酸化的蛋白。靶点特异性捕获抗体以重复方式定点到硝化纤维覆盖的玻片上。每个试剂盒有2张16-pad玻片，允许使用者检测单次试验最多32个样品，并产生512个数据点。细胞裂解液覆盖到玻片上随后使用生物素标记的抗体混合液进行孵育。链霉亲和素偶联的HRP和LumiGLO®试剂随后用以化学显色抗体。玻片的影像可以用数字显色系统或经典的化学发光膜显色。影像可以被分析或显色强度可以通过array分析软件定量。

Background

• 受体酪氨酸激酶转移的类固醇生长和存活信号刺激了生长因子能够激活Akt信号通路。Akt1/2是广泛表达的蛋白激酶有多种细胞底物，涉及到了对多个细胞反应的调控。Akt可以在两个不同的位点被磷酸化：被mTORC2在Ser473磷酸化和被胞膜激酶PDK1磷酸化Thr308. PI3K激酶是一个脂类激酶磷酸化肌醇磷脂的三个位点以形成接纳细胞膜Akt的结构。PTEN是一个脂类磷酸酶能够抑制PI3K激酶的活性以下调信号传出。mTOR整合了生长因子信号和营养信号，是两个大分子复合物的重要成分，mTORC1和mTORC2。mTOR的Ser2481的自磷酸化与它的激活相关。
p70 S6磷酸化mTORC1会导致激酶活化，随后激活蛋白合成。S6核糖体蛋白被认为是p70 S6激酶的下游，它Ser235/236的磷酸化表明了mTOR通路的活化。mTORC2复合物通过磷酸化Ser473激活Akt。Akt磷酸化PRAS40的Thr246会释放PRAS40对mTORC1的抑制作用。4E-BP1是翻译的抑制因子，能够抑制cap-依赖的翻译起始。4E-BP1被mTORC1高度磷酸化会去除这种抑制作用，引发cap-依赖的翻译激活。
Akt磷酸化促凋亡蛋白Bad的Ser112以及分别磷酸化多功能激酶GSK-3α和
GSK-3β的Ser21和Ser9，可以抑制它们的功能以及促进细胞生存。AMPK是一个能量传感器，AMP水平上升后磷酸化Thr172能够激活其功能。在低能量，高AMP水平的条件下，AMPK可以帮助确认类固醇突进，例如被Akt引发的信号，AMPK会降低水平指导能量水平恢复。
尽管不是Akt信号通路的组分，Erk1和Erk2激酶是Ras/MAP激酶信号通路的重要成分。Erk1/2 调控多种细胞功能，涉及了广泛的细胞过程，例如增殖，分化和运动。Erk和Akt信号在多个位点通过不同的机制互相调控。Erk能够被多种细胞外信号激活，包括生长因子，细胞因子，激素和神经递质，会导致Thr202和Tyr204的双重磷酸化。生长因子，多肽激素和神经递质刺激后Erk1/2可以激活90kDa核糖体S6激酶1（RSK1）。p90RSK1能够磷酸化多种底物，包括核糖体打那笔S6，并能够正向调控蛋白翻译和细胞生长。p90RSK1也可以被激酶激活以调控细胞压力应激。

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Application References

• Have you published research involving the use of our products? If so we'd love to hear about it. Please let us know!

Protocols

9474 :

ELISA*

Companion Products

12622 PathScan^® EGFR Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout)

12856 PathScan^® Stress and Apoptosis Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout)

7323 PathScan^® Intracellular Signaling Array Kit (Chemiluminescent Readout)

7982 PathScan^® RTK Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout)

常见问题及解答

如何选择抗体

我看到很多抗体都加了一个XP®，XP® 是什么意思？

有些抗体名称里有个括号，括号里面是什么意思？

我怎么知道有没有我需要的蛋白？

实验疑难问题解答

WB封闭用牛奶好还是BSA好？二抗稀释液用什么？

做磷酸化抗体的时候一定要用脱脂奶粉稀释吗？

我的抗体的浓度是多少？

在组织样本中如何操作

我用的是组织样本，该如何破碎？

CST 的抗体是否适用于全组织样本裂解物？

抗体芯片

抗体芯片的保质期是多久？有多个孔，我一次用不了那么多，该如何保存？

细胞因子

人细胞因子适用于老鼠吗？

应该怎样配制PH3.0，20 mM的柠檬酸？

在我使用蛋白时是否应该使用载体蛋白？

siRNA

siRNA有两个或多个的情况，该如何选择？哪个效果好？

ELISA标准品

ELISA 有标准品吗？我如果买了其他公司的标准品，可不可以配套使用？

定制抗体

需要更进一步的帮助吗？

我能够订购一个定制配方的抗体吗？

CST能够定制我的抗体吗？

储存运输及发表文章

CST如何确保抗体的质量？

我该如何储存我的抗体？多高的温度会影响抗体的稳定性？

我需要发表文章，需要知道你们的产地，该如何写?

公司介绍

• CST公司是一家由研究型科学家创建于1999年的家族式私营企业，在全球范围内拥有超过400多名员工。CST活跃于应用系统生物学研究，尤其是与癌症相关的领域。作为一家始终致力于科学研究的公司，CST深知抗体的高特异性和批次间性能的一致性至关重要。因此我们坚持自己生产所有的抗体，并在多种应用中进行严格的验证。同时，正是生产这些抗体的CST科学家为客户提供技术支持，帮助他们设计实验，解决问题以获得最可靠的结果。我们之所以这样做，是因为如果我们做实验，我们也想要得到同样的服务。事实上，CST的确是这样的。
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