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PathScan® Intracellular Signaling Array Kit (Chemiluminescent Readout)

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Cell Signaling(CST) 7323 PathScan® Intracellular Signaling Array Kit (Fluorescent Readout)

产品编号 7323 | Cell Signaling(CST)

产品描述

Kit Includes	Quantity	Applications	Reactivity	Homology†	MW (kDa)	Isotype
Detection Ab Cocktail (10X) - Intracellular Signaling Array Kit	300 µl
16-Well Gasket	2 ea
Array Slides - Intracellular Signaling Array Kit	2 ea
20X LumiGLO^®Reagent and 20X Peroxide #7003	5 ml each
PathScan^® Sandwich ELISA Lysis Buffer (1X) #7018	30 ml
HRP-Linked Streptavidin (10X)	300 µl
20X Array Wash Buffer	15 ml
Sealing Tape	2 sheets
Array Blocking Buffer	5 ml
Chemiluminescent Development Folder	2
Array Diluent Buffer	15 ml

Specificity / Sensitivity

PathScan® Intracellular Signaling Array Kit (Chemiluminescent Readout) detects the indicated cellular proteins and signaling nodes only when phosphorylated or cleaved at the specified residues. (see Array Target Map). No significant cross-reactivity has been observed between targets. This kit is optimized for cell lysates diluted to a total protein concentration between 0.2 and 1 mg/ml (see kit protocol). All capture antibodies have been validated for human and mouse-derived samples.
只有当特定残基磷酸化或裂解时，PathScan® Intracellular Signaling Array Kit (Chemiluminescent Readout)能够检测指示细胞蛋白和信号节点。（请参见靶点阵列图）。发现靶点之间没有显著的交叉反应。本试剂盒优化的细胞裂解液，可将总蛋白浓度稀释到0.2至1 mg/ml之间（见试剂盒指南）。所有捕获抗体已被验证为人和小鼠来源的样品。

Description

The PathScan® Intracellular Signaling Array Kit (Chemiluminescent Readout) is a slide-based antibody array founded upon the sandwich immunoassay principle. The array kit allows for the simultaneous detection of 18 important and well-characterized signaling molecules when phosphorylated or cleaved. Target-specific capture antibodies have been spotted in duplicate onto nitrocellulose-coated glass slides. Each kit contains two 16-pad slides, allowing the user to test up to 32 samples and generate 576 data points in a single experiment. Cell lysate is incubated on the slide followed by a biotinylated detection antibody cocktail. Streptavidin-conjugated HRP and LumiGLO® Reagent are then used to visualize the bound detection antibody by chemiluminescence. An image of the slide can be captured with either a digital imaging system or standard chemiluminescent film. The image can be analyzed visually or the spot intensities quantified using array analysis software.
PathScan® Intracellular Signaling Array Kit (Chemiluminescent Readout)是一个基于盖玻片的建立在夹心免疫原理之上的抗体阵列。当磷酸化或裂解时，阵列试剂盒可同时检测18个重要特征信号分子。可发现，捕获的靶特异性抗体被复制在硝酸纤维素膜包被的载玻片上。每个试剂盒包含2张16-pad 盖玻片，从而使用户能够在一次实验中测试32个样品，产生576个数据点。细胞裂解物在载玻片上孵育，其次是用生物素化检测抗体混合物。然后用链霉亲和素耦联的HRP和LumiGLO®试剂化学发光法可视化检测结合的抗体。载玻片上的图像可以通过数字成像系统或标准的化学发光显影中的任何一种方式获取。图像可以直观地分析，或使用阵列分析软件准确量化。

Background

磷酸化和蛋白水解是两个普遍的共价翻译后修饰，在生物学中代表重要的调控机制。检测一组细胞蛋白的这些修饰，在细胞生物学中发挥了很好的理解作用，提供了广阔的细胞内信号的简单印象。MAPK / ERK级联是最好的特征性和广泛研究的信号模块之一。它参与广泛的细胞过程，如增殖、分化和运动。MAPK/ Erk由范围广泛的细胞外信号激活，包括生长因子、细胞因子、激素、神经递质。它被双特异性激酶MEK1和MEK2双磷酸化苏氨酸（202位）和酪氨酸（204位）激活。p38和JNK MAPKs是信号传导部分两个额外结构相关的核心成分。p38和JNK由多种MAPK激酶通过类似的双磷酸化机制激活，与促炎细胞因子、压力条件或遗传毒性相响应。  Stat1 和Stat3都是参与免疫和炎症的重要信号分子，可以被各种细胞因子或生长因子激活。Stat1 和Stat3 由Jak家族细胞因子受体栓酪氨酸激酶，或者某些情况下的其他酪氨酸激酶，如Src，分别在酪氨酸（701位）和酪氨酸（705位）磷酸化。 Akt是一种蛋白激酶，通常响应发送生长和存活信号的生长因子的刺激。由TORC2复合物和PDK1分别磷酸化Akt丝氨酸（473位）和苏氨酸（308位），是Akt活化的可靠的预测因子。由Akt磷酸化促凋亡蛋白Bad丝氨酸（112位）和多功能激酶GSK-3β丝氨酸（9位），抑制其活性，促进细胞存活。mTOR是一个重要的信号中心，是两个大分子复合物TORC1和TORC2的一个重要组成部分。 mTOR丝氨酸（2448位）磷酸化，整合生长因子信号和养分供应，在细胞生长和动态平衡中发挥了重要作用。mTORC1磷酸化P70 S6激酶苏氨酸（389位），导致激酶活化和细胞周期的进程。S6核糖体蛋白在p70 S6激酶下游被发现，其丝氨酸（235/236位）的磷酸化反应了mTOR通路的活化作用，并可预测细胞周期进程。AMPK是一个能量传感器，由苏氨酸（172位）磷酸化激活，响应AMP水平升高。 AMPK调节脂肪酸代谢，以及调节蛋白质合成和细胞生长。HSP27是细胞应激的调控者，能够抵抗不良环境的变化。在p38 MAPK通路内，HSP27在丝氨酸（78位）磷酸化。p53在细胞应答DNA损伤和其他基因组畸变中起着重要的作用。通过ATM/ATR 或DNA-PK磷酸化，p53丝氨酸（15位）响应DNA损伤，导致其稳定化并积累。Caspase-3是一个细胞凋亡的关键执行者。 Caspase-3由内蛋白水解分裂天冬氨酸（175位）而被激活，并通过裂解细胞靶点，发挥其促凋亡活性。PARP是一种参与DNA修复的酶，是活化的caspase-3的主要底物之一。天冬氨酸（214位）的裂解导致PARP失活。裂解的caspase-3和裂解的PARP水平增加，是细胞凋亡的可靠指标。

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Application References

Chung, S. et al. (2015) PLoS One 10, e0134948.Applications:

Miyake, M. et al. (2013) Lab Invest 93, 768-78.Applications:

Have you published research involving the use of our products? If so we'd love to hear about it. Please let us know!

Protocols

7323 :

ELISA*

Companion Products

12622 PathScan^® EGFR Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout)

12785 PathScan^® EGFR Signaling Antibody Array Kit (Fluorescent Readout)

12856 PathScan^® Stress and Apoptosis Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout)

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13124 PathScan^® Th1/Th2/Th17 Cytokine Antibody Array Kit (Fluorescent Readout)

7744 PathScan^® Intracellular Signaling Array Kit (Fluorescent Readout)

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7982 PathScan^® RTK Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout)

9474 PathScan^® Akt Signaling Antibody Array Kit (Chemiluminescent Readout)

9700 PathScan^® Akt Signaling Antibody Array Kit (Fluorescent Readout)

常见问题及解答

公司介绍

CST公司是一家由研究型科学家创建于1999年的家族式私营企业，在全球范围内拥有超过400多名员工。CST活跃于应用系统生物学研究，尤其是与癌症相关的领域。作为一家始终致力于科学研究的公司，CST深知抗体的高特异性和批次间性能的一致性至关重要。因此我们坚持自己生产所有的抗体，并在多种应用中进行严格的验证。同时，正是生产这些抗体的CST科学家为客户提供技术支持，帮助他们设计实验，解决问题以获得最可靠的结果。我们之所以这样做，是因为如果我们做实验，我们也想要得到同样的服务。事实上，CST的确是这样的。
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品牌

CST

型号

7323

规格

1 Kit

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