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Cell Signaling(CST)  8794  SAPK/JNK Kinase Assay Kit (Nonradioactive)

产品编号  8794|  Cell Signaling(CST)

Cell Signaling Technology公司的细胞分析试剂盒提供了从头至尾的试剂和可行的操作步骤，从而在最少的时间内得到最精确的结果。这些充分验证的全套试剂盒可用于评估细胞生存、增殖、生存能力以及酶和激酶活性。

产品描述

Description

The SAPK/JNK Kinase Assay Kit (Nonradioactive) provides all the reagents necessary to measure SAPK/JNK activity in the cell. A phospho-SAPK/JNK Rabbit mAb linked to agarose beads is used to pull down SAPK enzyme from cell extracts. Upon addition of kinase buffer, c-Jun fusion protein and ATP, SAPK phosphorylates the c-Jun substrate. Phospho-c-Jun (Ser63) Antibody can then be used to measure SAPK activity by immunoblotting.

SAPK/JNK Kinase Assay Kit (Nonradioactive)提供了所有检测细胞中SAPK/JNK激酶活性所需的试剂。连接在琼脂糖珠子上的的phospho-SAPK/JNK Rabbit mAb用于拉下细胞提取物中的SAPK激酶。加入激酶缓冲液，c-Jun融合蛋白和ATP后，SAPK磷酸化c-Jun底物。随后使用Phospho-c-Jun (Ser63)抗体在免疫印迹实验中检测SAPK活性。

Background

应激活化蛋白激酶/Jun氨基末端激酶SAPK/JNK能够有效、优先地被多种环境压力激活，这些环境压力包括紫外照射和gamma 辐射、神经酰胺、炎性因子，在某些情况下也包括生长因子和GPCR激动剂 (1-6)。正如其他的 MAPKs，核心信号传导单元包括一个MAPKKK，通常是MEKK1-MEKK4，或一种混合谱系酶 (MLKs），这些MAPKKK激酶能磷酸化并激活 MKK4/7。活化后，MKKs磷酸化并激活SAPK/JNK 激酶 (2)。应激反应信号经Rho 家族(Rac, Rho, cdc42)的小GTP酶被传递到这个级联信号反应中 (3)。Rac1 和 cdc42蛋白都能调节MEKKs、 MLKs的激活(3)。另外一种情况是，MKK4/7能够通过生发中心激酶 (GCK)家族成员的刺激，在一个非GTP酶依赖机制中被激活 (4)。有三种不同的SAPK/JNK基因，而每一种都会经过选择性剪切产生多种异构体(3)。活化的二聚体SAPK/JNK，能转位到细胞核中，通过它对 c-Jun, ATF-2和其他转录因子的效应而调节转录过程(3,5)。

1 Davis, R.J. (1999) Biochem Soc Symp64, 1-12.

2 Ichijo, H. (1999) Oncogene18, 6087-93.

3 Kyriakis, J.M. and Avruch, J. (2001) Physiol Rev81, 807-69.

4 Kyriakis, J.M. (1999) J Biol Chem274, 5259-62.

5 Leppä, S. and Bohmann, D. (1999) Oncogene18, 6158-62.

6 Whitmarsh, A.J. and Davis, R.J. (1998) Trends Biochem Sci23, 481-5.

Application References

ØMauer, J. et al. (2014) Nat Immunol15, 423-30.Applications:

Have youpublished research involving the use of our products? If so we'd love to hear about it. Please let us know!

Protocols

8794 :

Western Blotting  Immunoprecipitation (Sepharose)  

Companion Products

Ø6093 c-Jun Fusion Protein

Ø7074 Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody

Ø9802 Kinase Buffer (10X)

Ø9803 Cell Lysis Buffer (10X)

Ø9804 ATP (10 mM)

常见问题及解答

如何选择抗体

Ø我看到很多抗体都加了一个XP®，XP® 是什么意思？

Ø有些抗体名称里有个括号，括号里面是什么意思？

Ø我怎么知道有没有我需要的蛋白？

实验疑难问题解答

ØWB封闭用牛奶好还是BSA好？二抗稀释液用什么？

Ø做磷酸化抗体的时候一定要用脱脂奶粉稀释吗？

Ø我的抗体的浓度是多少？

在组织样本中如何操作

Ø我用的是组织样本，该如何破碎？

ØCST 的抗体是否适用于全组织样本裂解物？

抗体芯片

Ø抗体芯片的保质期是多久？有多个孔，我一次用不了那么多，该如何保存？

细胞因子

Ø人细胞因子适用于老鼠吗？

Ø应该怎样配制PH3.0，20 mM的柠檬酸？

Ø在我使用蛋白时是否应该使用载体蛋白？

siRNA

ØsiRNA有两个或多个的情况，该如何选择？哪个效果好？

ELISA标准品

ØELISA 有标准品吗？我如果买了其他公司的标准品，可不可以配套使用？

定制抗体

Ø需要更进一步的帮助吗？

Ø我能够订购一个定制配方的抗体吗？

ØCST能够定制我的抗体吗？

储存运输及发表文章

ØCST如何确保抗体的质量？

Ø我该如何储存我的抗体？多高的温度会影响抗体的稳定性？

Ø我需要发表文章，需要知道你们的产地，该如何写?

公司介绍

CST公司是一家由研究型科学家创建于1999年的家族式私营企业，在全球范围内拥有超过400多名员工。CST活跃于应用系统生物学研究，尤其是与癌症相关的领域。作为一家始终致力于科学研究的公司，CST深知抗体的高特异性和批次间性能的一致性至关重要。因此我们坚持自己生产所有的抗体，并在多种应用中进行严格的验证。同时，正是生产这些抗体的CST科学家为客户提供技术支持，帮助他们设计实验，解决问题以获得最可靠的结果。我们之所以这样做，是因为如果我们做实验，我们也想要得到同样的服务。事实上，CST的确是这样的。

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