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p38 MAP Kinase Assay Kit (Nonradioactive)
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Cell Signaling(CST)  9820  p38 MAP Kinase Assay Kit (Nonradioactive)

产品编号  9820|  Cell Signaling(CST)

Cell Signaling Technology公司的细胞分析试剂盒提供了从头至尾的试剂和可行的操作步骤,从而在最少的时间内得到最精确的结果。这些充分验证的全套试剂盒可用于评估细胞生存、增殖、生存能力以及酶和激酶活性。

产品描述

Kit Includes

Quantity

Applications

Reactivity

Homology†

MW (kDa)

Isotype

20X LumiGLO®Reagent and 20X Peroxide #7003

5 ml each

Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074

100 µl

Goat

Anti-biotin, HRP-linked Antibody #7075

100 µl

Goat

Biotinylated Protein Ladder Detection Pack #7727

100 µl

Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (28B10) Mouse mAb (Sepharose® Bead Conjugate) #9219

400 µl

Z

40

Mouse IgG1

Phospho-ATF-2 (Thr71) Antibody #9221

100 µl

70

Rabbit

ATF-2 Fusion Protein #9224

40 µg

34

Rabbit

Kinase Buffer (10X) #9802

15 ml

Cell Lysis Buffer (10X) #9803

15 ml

ATP (10 mM) #9804

50 µl

Description

Nonradioactive p38 MAP Kinase Assay Kit provides all the reagents necessary to measure p38 MAP kinase activity in cells. First, Immobilized Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) mAb is used to immunoprecipitate p38 MAP kinase, then an in vitro kinase assay is performed using ATF-2 as a substrate. ATF-2 phosphorylation is detected by Western blotting using Phospho-ATF-2 (Thr71) Antibody.Nonradioactive p38 MAP Kinase Assay Kit提供所有测量细胞内p38 MAP激酶活性所需的试剂。首先,固定化的Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) mAb用于免疫沉淀p38 MAP激酶,然后以ATF-2为底物进行体内激酶分析。Western blotting分析检测ATF-2 的磷酸化,使用的抗体是Phospho-ATF-2 (Thr71) Antibody。

Background

激酶 (MAPK), 也被称为 RK (1)、CSBP (2),是哺乳动物体内酵母HOG激酶的同源物,它参与信号传递级联反应,该级联反应能控制细胞对细胞因子和应激反应的应答(1-4)。p38 MAPK的四种异构体, p38α, β, γ (也被称为Erk6、SAPK3), 和δ (也被称为SAPK4)已经被鉴定出来。与SAPK/JNK途径相似,p38 MAPK由各种细胞应激反应激活,包括渗透压休克 、炎性反应、细胞因子、LPS、UV照射和生长因子。(1-5) MKK3, MKK6,SEK磷酸化p38 MAPK蛋白的苏氨酸(180位点)和酪氨酸(182位点)并使其活化。活化的p38 MAPK能将MAPKAP激酶磷酸化、活化 (3),并磷酸化转录因子ATF-2(5), Max (6), and MEF2 (5-8)。SB203580 (4-(4-fluorophenyl)-2-(4-methylsulfinylphenyl)-5-(4-pyridyl)-imidazole)是p38 MAPK的选择性抑制子。该复合物能通过p38 MAPK抑制MAPKAPK-2的活化和HSP27后续磷酸化 (9)。SB203580通过结合到ATP接合点上而抑制p38 MAPK的摧毁活性,但是不能通过上游激酶而抑制p38 MAPK的磷酸化(10)。

1 Rouse, J. et al. (1994) Cell78, 1027-37.

2 Han, J. et al. (1994) Science265, 808-11.

3 Lee, J.C. et al. (1994) Nature372, 739-46.

4 Freshney, N.W. et al. (1994) Cell78, 1039-49.

5 Raingeaud, J. et al. (1995) J Biol Chem270, 7420-6.

6 Zervos, A.S. et al. (1995) Proc Natl Acad Sci U S A92, 10531-4.

7 Zhao, M. et al. (1999) Mol Cell Biol19, 21-30.

8 Yang, S.H. et al. (1999) Mol Cell Biol19, 4028-38.

9 Cuenda, A. et al. (1995) FEBS Lett364, 229-33.

10 Kumar, S. et al. (1999) Biochem Biophys Res Commun263, 825-31.

Application References

ØZhong, Y. et al. (2014) Clin Cancer Res20, 6200-11.Applications:

ØLiu, Y. et al. (2014) PLoS One9, e111343.Applications:

ØBanerjee, S. et al. (2002) . Journal of Virology76, 5937-5948.Applications:

ØHuang, C. et al. (1999) J. Biol. Chem.274, 12229-12235.Applications:

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Protocols

9820 :

Western Blotting  Immunoprecipitation (Sepharose)  

Companion Products

Ø7727 Biotinylated Protein Ladder Detection Pack

Ø9802 Kinase Buffer (10X)

Ø9803 Cell Lysis Buffer (10X)

常见问题及解答

如何选择抗体

Ø我看到很多抗体都加了一个XP®,XP® 是什么意思?

Ø有些抗体名称里有个括号,括号里面是什么意思?

Ø我怎么知道有没有我需要的蛋白?

实验疑难问题解答

ØWB封闭用牛奶好还是BSA好?二抗稀释液用什么?

Ø做磷酸化抗体的时候一定要用脱脂奶粉稀释吗?

Ø我的抗体的浓度是多少?

在组织样本中如何操作

Ø我用的是组织样本,该如何破碎?

ØCST 的抗体是否适用于全组织样本裂解物?

抗体芯片

Ø抗体芯片的保质期是多久?有多个孔,我一次用不了那么多,该如何保存?

细胞因子

Ø人细胞因子适用于老鼠吗?

Ø应该怎样配制PH3.0,20 mM的柠檬酸?

Ø在我使用蛋白时是否应该使用载体蛋白?

siRNA

ØsiRNA有两个或多个的情况,该如何选择?哪个效果好?

ELISA标准品

ØELISA 有标准品吗?我如果买了其他公司的标准品,可不可以配套使用?

定制抗体

Ø需要更进一步的帮助吗?

Ø我能够订购一个定制配方的抗体吗?

ØCST能够定制我的抗体吗?

储存运输及发表文章

ØCST如何确保抗体的质量?

Ø我该如何储存我的抗体?多高的温度会影响抗体的稳定性?

Ø我需要发表文章,需要知道你们的产地,该如何写?

公司介绍

CST公司是一家由研究型科学家创建于1999年的家族式私营企业,在全球范围内拥有超过400多名员工。CST活跃于应用系统生物学研究,尤其是与癌症相关的领域。作为一家始终致力于科学研究的公司,CST深知抗体的高特异性和批次间性能的一致性至关重要。因此我们坚持自己生产所有的抗体,并在多种应用中进行严格的验证。同时,正是生产这些抗体的CST科学家为客户提供技术支持,帮助他们设计实验,解决问题以获得最可靠的结果。我们之所以这样做,是因为如果我们做实验,我们也想要得到同样的服务。事实上,CST的确是这样的。

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品牌
CST
型号
9820
规格
1 Kit
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