ZENOAQ STEM-CELLBANKER® GMP grade

(GMP 级无血清素有成分明确细胞冻存液)

产品编号  STEM-CELLBANKER® GMP grade | ZENOAQ

CELLBANKER® 细胞・组织用冻结保存液

• ZENOAQ公司提供的CELLBANKER^® 系列是完全细胞冻存液，产品质量稳定可靠，使用方便。经过改良和优化，型类丰富的CELLBANKER^® （含符合细胞冻存的独特配方，保护细胞免受冰晶和溶质损伤，能有效地提高复苏细胞存活率和活力，助科研工作者摆脱程式繁琐、操作复杂、微生物污染可能性高的冻存调配工作，专注于下游的研究。

美国FDA [MF # 15785] 和日本PMDA 已正式接受 STEM-CELLBANKER 细胞冻存液的 master file (MF) 登记申请。

STEM-CELLBANKER^® DMSO Free GMP grade已经上市！

CELLBANKER® 系列细胞冻存液的优点：

细胞存活率高，细胞功能表达能力维持完整

品质稳定，性能可靠，无批次差异

可直接使用，无需稀释、过滤、添加等繁琐，方便简捷

无需购置可编程序降温机或液氮罐

CELLBANKER® 系列产品性能出色使用方便，在日本得到科研工作者的广泛信赖。 至今约80% 的日本科研工作者选择使用它来进行细胞冻存。与一般市场流通产品和自配细胞冻存液相比，它有以下特点：

无需繁琐调配工作，细胞可直接存放于-80度的冰箱冻存

提供长期的细胞冻存，复苏后存活率90%以上（本公司试验数据证明）

对超过80余种细胞进行实际冻存测试，产品的可用性得到确认

产品描述

特征:

STEM-CELLBANKER^® GMP grade 是ZENOAQ公司针对冻存各类贵重的干细胞（胚胎干细胞 、诱导多能干细胞、间充质干细胞等）而特别配制，完全按照Good Manufacture Practice (GMP)规范进行生产和质量管理的细胞・组织冻存液。

有效提高各类干细胞的复苏存活率，而不影响其染色体组形、增殖能力和分化能力。

不会对冻存细胞的DNA或RNA造成损伤，能用来冻存组织。

完全使用日/美/欧药典等最高等级原料，所含成分明确。

不含异源动物成分(Xeno-free)。

完全配方的冻存液，无需调配即可使用。可直接存放于负80度冰箱（不须程序降温），省事省力省时间。

本产品已取得美国FDA和日本PMDA的Drug Master File (DMF)登记号。

本产品已经上市。

规格包装:

20ml, 100ml/瓶

产品应用实例:

• 1. 使用STEM-CELLBANKER^®对人体胚胎干细胞（hESC） 和诱导多能（iPS）干细胞进行实际冻存测试。
• 资料来源：瑞典卡罗林斯卡医学院附属医院妇产科临床科学部Outi Hovatta教授
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• 测试冻存液：STEM-CELLBANKER^®冻存液 vs 常规细胞冻存液（细胞培养基 + 10% DMSO + 血清代替品）细胞存活率评估方法：Trypan Blue 和 Live/Dead assay kit试剂盒
• 結果: 在没有对细胞的染色体组形、增殖能力和分化能力造成影响的情况下，STEM-CELLBANKER^®冻存液明显提高了HS293、HS306和ChiPSA细胞的存活率。上图显示STEM-CELLBANKER^®冻存细胞的复苏存活率获得明显提高。下图显示各复苏细胞的增殖能。
• ＊鸣谢Outi Hovatta教授和Frida Holm女士提供以上资料
• 2. 使用STEM-CELLBANKER^®对人体间质干细胞（Human Mesenchymal Stem Cells）和血管内皮前体细胞（Endothelial Progenitor Cells）进行实际冻存测试。
• 筑波大学再生医疗讲座　大根田修教授提供




	MSCs	EPCs
STEM-CELLBANKER®	>95%	>90%




• 细胞株：人体脐带血来源间质干细胞（MSCs）和血管内皮前体细胞（EPCs）测试冻存液：STEM-CELLBANKER^®细胞冻存液细胞冻存方法：冻存细胞于-80度冰箱, ３日后移至-192度液氮管，冻存72 日后复苏。.细胞存活率评估方法：Trypan Blue
• 测试结果：MSCs 和EPCs的存活率分别高达95%　和　90%以上。结果也显示STEM-CELLBANKER^®细胞冻存液没有对干细胞的增殖和分化能力造成影响。
• 欲知详细内容，请参考 MSCs 或 EPCs
• ＊鸣谢　大根田修(Ohneda Osamu)教授和长野真澄(Nagano Masumi)博士提供以上资料
• 3. 使用STEM-CELLBANKER^®对小鼠胚胎干细胞（129SV）进行实际冻存测试。
• ZENOAQ研究所　细胞工学组
• 
• 细胞株：129SV (Mouse ES cell) 测试冻存液：ZENOAQ 产品（CELLBANKER^® 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER^®）

使用手册 (适用于CELLBANKER^®系列各产品) :

• 细胞冷冻保存方法
• 选择冻存处于对数生长数的细胞有助于提高复苏细胞存活率。

按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。

按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105 至 5×106 cells/ml）。

取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞(参考离心条件：1,000~2,000rpm，4°C，3至5分)。移去离心管中的上清液。

加入适量的CELLBANKER^® 细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为 5×105 至 5×106 cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。

将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。

直接将含细胞混合液的冻存管放入-80°C冰箱，长期冷冻保存。

若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80°C冰箱后至少一昼夜）移至-196°C液氮罐。

细胞数仅作为参考数据，依据各自目的可有不同

• 

冻存细胞复苏方法

从冰箱里取出细胞冷冻保存管，立即放入37°C 振动水浴槽中快速解冻。

待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有9ml该细胞培养基的试管中，混合均匀。

离心收集培养细胞((参考离心条件：1,000~2,000rpm，4°C，3至5分)，移去上清液。

清洗细胞，充分洗净残留冻存液。

加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后，将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。

精检后，研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。

• 4. 使用STEM-CELLBANKER^®对小鼠正常肾脏组织进行冻存测试
• 资料来源：ZENOAQ中央研究所




STEM-CELLBANKER® → -80℃
HE染色標本	Caspase3免疫染色標本










取材后立刻以福尔马林固定
HE染色標本	Caspase3免疫染色標本




• 从小鼠取出5mm3大小的肾脏组织，投入1ml的STEM-CELLBANKER^®冻存液后直接放置于负80度冰箱进行冻结。之后，对经解冻、清洗、福尔马林固定和石蜡包埋的组织块进行HE染色和Caspase3染色。组织学检查结果发现，与未经冻结的组织状态（对照）相比， STEM-CELLBANKER^®冻存组织块没有受到明显的损伤，证明STEM-CELLBANKER^®能够应用于冻结组织块。此外，Caspase3染色结果呈阴性反応，表示没有细胞凋亡发生。
• 5. 利用微阵列芯片（Microarray）对STEM-CELLBANKER^®冻存细胞展开基因表达分析
• 
• 从未经冻存的培养细胞和经STEM-CELLBANKER^®冻存的细胞抽出total RNA，以微阵列解析进行遗传基因的平行对比分析。结果发现两组细胞的大多数基因之间的表达变化小于1.6倍。
• 测试细胞：小鼠肺纤维芽细胞
• 参考文献

Shimazu et al. (2015) Serum- and xeno-free cryopreservation of human umbilical cord tissue as mesenchymal stromal cell source. Cytotherapy, 2015; 17: 593 - 600.

Nakagawa M et al. (2014) A novel efficient feeder-free culture system for the derivation of human induced pluripotent stem cells. Scientific Reports 4 Article, number:359.

Miyamoto Y et al. (2012) Cryopreservation of Induced Pluripotent Stem Cells. Cell Medicine., Vol. 3, pp. 89-95, 2012.

Saliem M et al. (2012) Improved cryopreservation of human hepatocytes using a new xeno free cryoprotectant solution. World J Hepatol. May 27;4(5):176-83.

Holm et al. (2010) An effective serum- and xeno-free chemically defined freezing procedure for human embryonic and induced pluripotent stem cells. Hum Reprod. 25(5):1271-9. Epub 2010 Mar 5.

Nakamura A et al. (2010) Human primary cultured hepatic stellate cells can be cryopreserved. Med Mol Morphol. 43:107-115.

产品成分说明:

限定化学成分细胞冻存液，含有DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分、pH调节剂等国际药典 ［美、欧、日本药方局级］成分。

储存方法

储存于４度以下。质量保障期从产品的生产日期起算，为期３年。3个月以上没有使用CELLBANKER^®冻存液的计划时，尽可能冷冻保存。为避免重复冻结-解冻过程可能导致的CELLBANKER^®品质下降和性能降低，推荐将 100mL 产品分装小瓶后，再存放于 4°C以下或－20°C冰箱冻存。

质量保障承诺

STEM-CELLBANKER^® GMP grade细胞冻存液经过严格内毒素、pH、渗透压和微生物检查，确保产品不含细菌、霉菌以及支原体。

使用小鼠胚胎干细胞（Mouse ES Cells）、Jurkat　和SK-007细胞验证性能测试冻存细保存活率达８０％以上．

• MSDS : STEM-CELLBANKER^® GMP grade MSDS

注意事项

CELLBANKER^®系列产品只供实验室研究使用，是试剂级产品。

我们推荐用户在使用本产品之前，事先对所使用的细胞进行至少为期 1 周的试验性细胞冷冻保存培养。确认性能后再进行正式冻存。

免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

常见问题及解答

Q1. 哪些细胞株(系)适合使用CELLBANKER^®来进行细胞冷冻保存？

• 几乎所有细胞株（系）都适合使用CELLBANKER^® 进行细胞冻存。

Q2. CELLBANKER^®1, 1 plus 及 2 之间有什么区别？

• CELLBANKER^®1 及1 plus 是含血清型细胞冻存液; CELLBANKER^®2 是不含血清、不含蛋白成分的细胞冻存液。研究者可依据各自需要选择使用。无论是含血清型还是不含血清型，它们的冻存效果和复苏存活率是相同的。

Q3. CELLBANKER^® 产品中采用了什么样的血清？而这些血清是源自哪个国家？

• 含血清型CELLBANKER^® 产品中是采用源自澳大利亚或新西兰的新生仔牛血清（Newborn Bovine Serum），严格按照动物防疫法及相关规定选择血清。

Q4. 在使用CELLBANKER^®的细胞冻存过程中，为何不需要程序降温步骤进行逐步降温？

• CELLBANKER^® 是专门为直接存放于约-85℃冰箱中，可快速冻存而配制的细胞冷冻保存液。因此，使用程序降温步骤或直接把细胞存放于液氮中时将可能有损细胞的存活率。若用户觉得有必要把细胞存放于液氮罐时，我们建议先把细胞存放于-80℃冰箱，待细胞冻结以后再移至液氮罐中。

Q5. 能否告诉我关于CELLBANKER^® 的详细配方？ 它是否包含了二甲亚砜(DMSO)？

• 我们非常抱歉不能在此公开CELLBANKER^® 的详细配方。我们的产品中使用了DMSO 作为细胞冻存保护剂的一种。我们的配方中的DMSO 基本上不会为细胞带来影响。我们建议在细胞解冻复苏操作时，要注意充分清洗去残留的细胞冻存液。

Q6. CELLBANKER^® 能不能用来保存普通细胞，淋巴球或干细胞？

• 我们的试验证明CELLBANKER^® 可用于绝大多数细胞株、淋巴球、干细胞的冷冻保存。但也可能有数种细胞株是不适合使用CELLBANKER^® 来进行冻存的，用户在没有确认是否可使用CELLBANKER<^® 时，建议在进行正式细胞冻存之前，事先进行为期一周的试验性冻存培养后，再开始进行正式细胞冻存。

Q7. 能否告诉我关于 CELLBANKER^® 的储存方法？

• 通常，我们建议用户把CELLBANKER^® 存放于4℃ 的冰箱，尽早使用完。如果储存时间可能超过三个月，我们建议用户依据各自使用量，先分装小瓶后，再储存在-20℃的冷冻冰箱里。为保持产品的优良性能，建议对同一包装的CELLBANKER^® 冻存液不进行超过3 次的冷冻-解冻操作。

Q8. CELLBANKER^® 能否使用于医疗领域?

• CELLBANKER^® 是实验用试剂规格，不能使用于医疗领域。

Q9. 我能从哪里买到CELLBANKER^®？

• 「タカラバイオ株式会社」是我们在日本国内的总代理商。在日本，请向「タカラバイオ株式会社」咨询。
• CELLBANKER^® 现已在韩国和新加坡建立了代理销售商。

Q10. Is it possible to buy CELLBANKER^® in other countries (out of Japan)?

• 「タカラバイオ株式会社」是我们在日本国内的总代理商。在日本，请向「タカラバイオ株式会社」咨询。CELLBANKER^®现已在韩国和新加坡建立了代理销售商。

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